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T7 RNA聚合酶是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。T7 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入，合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。

T7 RNA聚合酶不仅可以进行常规的RNA合成，还可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T7启动子有高度的特异性。

图1.本制品与N公司的T7 RNA Polymerase以含有T7 Promoter的PCR产物为模板进行体外转录时的效果图。在20μL反应体系(40mM Tris-HCl pH7.9,2mM Spermidine,6mM MgCl₂,1mM DTT)中，加入以含有T7 Promoter的PCR产物作为模板DNA以及图中指定量的本制品或N公司的T7 RNA Polymerase，37℃孵育1h，70℃孵育10min终止反应，加入2U DNase I溶液消化模板DNA，得到的RNA转录产物为101nt。取出5μL反应产物，加入1μL 6×DNA上样缓冲液，95℃变性5min，然后室温条件下用含7M Urea的15%聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，以1X TBE作为电泳液，180V电泳120min。电泳结束后，NadRed红色核酸染料 2000倍稀释后室温染色10min，拍照观察结果。如图所示，本制品与N公司的竞品相比，具有相近或略优的转录效果。


用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。


由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体T7 RNA Polymerase基因。


一个活性单位是指37℃条件下，60分钟内，催化1nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl₂，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml [³H]-ATP，20μg/mL plasmid DNA containing the specific T7 RNA Polymerase promoter sequence。

组分	1kU	5kU	25kU	100kU
T7 RNA Polymerase(50U/μL)	20μL	100μL	500μL	2mL
10×T7 Transcription Buffer	25μL	120μL	600μL	1.2mL×2

保存：-20℃


50mM Tris-HCl(pH7.5@25℃)，100mM NaCl，1mM DTT，1mM EDTA，50% (v/v) Glycerol,0.1% (w/v) Triton X-100。


10×T7 Transcription Buffer：
400mM Tris-HCl(pH7.9@25℃)，20mM spermidine,60mM MgCl₂，10mM DTT。


不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。

• 70℃加热10分钟可使T7 RNA Polymerase失活。
  
• 加入适量EDTA也可以使T7 RNA Polymerase失活。
  
• 螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制T7 RNA Polymerase的活性。

T7 consensus promoter sequence如下，其中的G为转录的第一个碱基。
TAATACGACTCACTATAGGGAGA
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